天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类，用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程被利用。研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转入酿酒酵母菌，获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精。请回答下列问题： (1)将淀粉酶基因切割下来所用的工具是________，用_______将淀粉酶基因与载体拼接成新的DNA分子，此表达载体除目的基因外，必须含有______、_______和标记基因。 (2)若要鉴定淀粉酶基因是否插入酿酒酵母菌，可采用的检测方法是_______________，该项方法要用____________作探针进行检测；若要鉴定淀粉酶基因是否翻译成淀粉酶，可采用_____方法检测。 (3)采用PCR技术可对目的基因进行体外扩增。该反应体系的主要成分应包含：扩增缓冲液(含Mg 2+ )、水、4种dNTP、模板DNA、引物和____________。其中引物有_________种，实质是_______，假如引物都用 3 H标记，从理论上计算循环4次，所得DNA分子中含有 3 H标记的占____。 (4)已知BarnHⅠ与BglⅡ的识别序列及切割位点如下图所示，用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BarnHⅠ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作，若干循环后_______序列明显增多。 (5)基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质，__________却能生产自然界不存在的新的蛋白质，但最终还须通过改造基因来实现，原因是__________。