在大肠杆菌表达中表达外源蛋白时,一般要与大肠杆菌的一段短肽一起表达,形成融合蛋白。为什么?
A.
A克隆基因能否有效地翻译为mRNA,不仅取决于核糖体结合位点,还与编码区的起始核苷酸序列有关。可能是因为在核苷酸链内,碱基对形成二级结构,干扰核糖体与核糖体结合位点的结合,当相关的区域均由大肠杆菌的天然序列组成时,则没有这种可能。
B.
起始部位的细菌肽段,可以防止宿主细胞降解融合蛋白,使它能够稳定地存在于细胞内。缺乏细菌肽段的蛋白,通常被宿主破坏掉了。
C.
细菌部分可以由一段肽链组成,这条肽链倡导大肠杆菌的蛋白到达细胞内正确的位置。如可将表达蛋白分泌到培养基中。
D.
细菌部分的融合蛋白可以通过亲和层析回收。如含有大肠杆菌谷胱甘肽-S-转移酶的融合蛋白,可以结合到含有谷胱甘肽的琼脂糖柱上而被纯化。